Verificación del desempeño general del método Elecsys® Chagas en la detección de anticuerpos específicos contra Trypanosoma cruzi / Verification of the general performance of the Elecsys® Chagas method in the detection of specific antibodies against Trypanosoma cruzi

Resumen La enfermedad de Chagas es una parasitosis producida por Trypanosoma cruzi, prevalente principalmente en el continente americano, y observada en regiones no endémicas, producto de viajes y migraciones. El objetivo de este estudio fue comparar el desempeño del ensayo Elecsys® Chagas (Roche Diagnostics Alemania) (ECLIA) para el diagnóstico de la infección chagásica crónica con el método estándar y evaluar su posible empleo en reemplazo del método automatizado existente. Se estudiaron 77 muestras de sueros pertenecientes a pacientes con diagnóstico presuntivo de enfermedad de Chagas, procesadas por los distintos métodos disponibles en la Sección Parasitología del Hospital Muñiz: inmunoensayo quimioluminiscente de micropartículas (CMIA) (Abbott), enzimoinmunoanálisis de adsorción (ELISA) (Wiener) y hemaglutinación indirecta (HAI) (Lab. Lemos S.R.L.). Los resultados de los métodos ELISA y HAI fueron comparados con los obtenidos en la prueba ECLIA, y estos a su vez con el método automatizado disponible. De las muestras analizadas, 22 (28,57%) presentaron IgG anti-T. cruzi y 55 (71,43%) resultaron negativas. Con el método ECLIA se logró un 100% en los parámetros de desempeño, con diferencias en los intervalos de confianza. La razón de verosimilitud positiva y la razón de verosimilitud negativa clasificaron al ensayo como excelente y la potencia global del test apoyó esa afirmación. Los métodos inmunológicos automatizados ayudan a la performance diagnóstica en la etapa crónica de la enfermedad de Chagas, permiten minimizar errores, favorecen la velocidad de emisión de los resultados y, debido a su alta sensibilidad y especificidad, en ciertos escenarios podrían proponerse para usar como única técnica.

Abstract Chagas disease is a parasitosis caused by Trypanosoma cruzi, prevalent mainly in the American continent, and observed in non-endemic regions as a result of travel and migration. The objective of this study was to compare the performance of the Elecsys® Chagas (Roche Diagnostics Alemania) (ECLIA) assay for the diagnosis of chronic Chagas infection with the diagnostic standard, and to evaluate its possible use as a replacement for the existing automated method. A total of 77 serum samples belonging to patients with a presumptive diagnosis of Chagas disease were evaluated, processed by the different methods available in the Parasitology Section of Hospital Muñiz: microparticle chemiluminescent immunoassay (CMIA) (Abbott), enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) (Wiener) and indirect hemagglutination (HAI) (Lab. Lemos S.R.L). The results of the ELISA and HAI methods were compared with those obtained in the ECLIA test, and these in turn with the available automated method. Of the samples analysed, 22 (28.57%) presented IgG anti-T. cruzi and 55 (71.43%) were negative. With the ECLIA method, 100% was achieved in the performance parameters, with differences in the confidence intervals. The positive likelihood ratio and the negative likelihood ratio classify the essay as excellent, and the overall power of the test supports this statement. Automated immunological methods help diagnostic performance in the chronic stage of Chagas disease, allow minimising errors, favour the speed of issuance of results, and due to the high sensitivity and specificity, in certain scenarios, they could be proposed for use as single technique.

Resumo A doença de Chagas é uma parasitose causada pelo Trypanosoma cruzi, prevalente principalmente no continente americano, e observada em regiões não endêmicas em decorrência de viagens e migrações. O objetivo deste estudo foi comparar o desempenho do ensaio Elecsys® Chagas (Roche Diagnostics Alemanha) (ECLIA) para o diagnóstico da infecção crônica de Chagas com o método padrão e avaliar seu possível uso em substituição do método automatizado existente. Foram avaliadas 77 amostras de soro pertencentes a pacientes com diagnóstico presuntivo de doença de Chagas, processadas pelos diferentes métodos disponíveis na Seção de Parasitologia do Hospital Muñiz: imunoensaio quimioluminescente de micropartículas (CMIA) (Abbott), ensaio imunoenzimático de adsorção (ELISA) (Wiener) e hemaglutinação indireta (HAI) (Lab. Lemos S.R.L). Os resultados dos métodos ELISA e HAI foram comparados com os obtidos no teste ECLIA, e estes por sua vez com o método automatizado disponível. Das amostras analisadas, 22 (28,57%) apresentaram IgG anti-T. cruzi e 55 (71,43%) foram negativos. Com o método ECLIA, foram obtidos 100% nos parâmetros de desempenho, com diferenças nos intervalos de confiança. A razão de verossimilhança positiva e a razão de verossimilhança negativa classificam o ensaio como excelente, e a potencia geral do teste conformou essa afirmação. Os métodos imunológicos automatizados auxiliam no desempenho diagnóstico na fase crônica da doença de Chagas, permitem minimizar erros, favorecem a rapidez na emissão dos resultados e, devido à alta sensibilidade e especificidade, em determinados cenários, poderiam ser propostos para uso como técnica única.

Análisis de técnicas treponémicas y no treponémicas en el tamizaje serológico de sífilis / Analysis of treponemical and non treponemical techniques for syphilis blood bank screening

Introducción: las infecciones producidas por el Treponema pallidum causante de la sífilis han alcanzado gran trascendencia entre las enfermedades infecciosas transmitidas por transfusión (ITT) y un nuevo repunte a nivel mundial. Debido a las diferentes etapas clínicas que presenta la enfermedad, el desempeño de cada prueba de detcción varía y se limita. Así, la elección de una técnica de tamizaje adecuada se convierte en un punto fundamental para garantizar la calidad y seguridad de cada hemocomponente despachado. Objetivo: analizar y evaluar la eficacia de cuatro técnicas de tamizaje serológico. Métodos: se realizó un estudio comparativo transversal con 1 376 muestras seleccionadas al azar a nivel nacional en el mes de diciembre 2015. Se compararon las técnicas de inmunocromatografía (IC), floculación (VDRL), electroquimioluminiscencia (ECLIA) y microelisa. Se analizó la eficacia individual de cada técnica y comparativa con respecto a la gold standard (FTA-ABS) utilizando para ello el coeficiente de correlación Cohen-Kappa (К). Resultados: las cuatro pruebas presentaron un nivel de concordancia del 98,67 por ciento. Del total de resultados discrepantes el 63,16 por ciento fueron generados por VDRL, la cual al mismo tiempo demostró tener el menor rendimiento (k=0,14) y alcanzó los valores más bajos de sensibilidad (s=69 por ciento) y especificidad (e=45 por ciento), lo cual contrastó con la IC que demostró el mayor rendimiento (k=0,863, s=100 por ciento, e=0,8 2 por ciento), seguido de la ECLIA (k=0,801, s=96 por ciento, e=0,82 por ciento) y el microelisa (k=0,711, s=100 por ciento, e=0,64 por ciento). Conclusión: se evidencia la necesidad de utilizar pruebas de nuevas tecnologías en el tamizaje serológico de sífilis y remplazar el uso de VDRL, ya que una correcta selección asegura el descarte de hemocomponentes en el número correcto (evitando grandes pérdidas de sangre y de dinero) y, en especial se asegura la calidad sanitaria de cada hemocomponente(AU)

Introduction: Infections produced by Treponema pallidum, which causes syphilis, have reached an important high level among infectious transmitted by transfusion (ITT). Due to the different clinical stages of the disease, the performance of each test is varied and limited. Thus, the choice of a suitable screening technique becomes a fundamental point in a blood bank, to guarantee the quality and safety of each blood component dispatched. Objective: The aim of this study was to analyze and evaluate the performance of four serological screening techniques. Methods: A cross-sectional study was conducted with 1 376 randomly selected samples nationwide in December 2015. The techniques used were immunochromatography (IC), flocculation (VDRL), electrochemiluminescence (ECLIA) and microelisa, and we compared the performance of each one and with respect to the gold standard (FTA-ABS) by using the Cohen-Kappa correlation coefficient (K). Results: The four tests had a concordance level of 98.67 percent. Of the total discrepant results the 63.16 percent were generated by VDRL, which at the same time showed the worst performance (k=0,14) and reached the lowest values ​​of sensitivity (s=69 percent) and specificity (e=45 percent). That contrasted with IC, which showed the best performance (k=0,883, s=100 percent, e=82 percent), followed by ECLIA (k=0,801, s=96 percent, e=0,82 percent) and microelisa (k=0,711, s=100 percent, e=0.64 percent). Conclusion: There is a necessity to use tests with new technologies in the serological screening of syphilis and to replace the use of VDRL in a blood bank, due to a correct selection, ensures the quality and the disposal of blood components in the correct number avoiding great losses of blood and money(AU)

Estudio comparativo de dos métodos para la cuantificación del antígeno carcinoembrionario / Comparative study of two methods for carcinoembryonic antigen quantification / Estudo comparativo de dois métodos para a quantificação do antígeno carcinoembrionário

El antígeno carcinoembrionario (CEA) es una glicoproteína ampliamente utilizada como complemento del diagnóstico, monitoreo de tratamiento y evolución del cáncer colorrectal. El objetivo del presente trabajo fue realizar un análisis comparativo entre dos métodos para la determinación de CEA: electroquimioluminiscencia y quimioluminiscencia, en muestras de suero de 57 pacientes con diagnóstico de cáncer, principalmente colorrectal. Cuando se analizaron los datos totales se obtuvo una elevada correlación (r=0,9135, p<0,00001). Al realizar un corte de los resultados tomando como límite el valor de 4 ng/mL se observó que las mayores discrepancias entre métodos estuvieron en los valores considerados dentro del rango normal (r=0,5716, p<0,0014, n=29). Por el contrario, en concentraciones mayores al límite de corte, la correlación fue elevada (r=0,9453, p<0,00001, n=28). Estos resultados sugieren que, a diferencia de lo descripto por los fabricantes, los valores de CEA obtenidos por ambos métodos son comparables. La menor correlación observada en concentraciones inferiores a 4 ng/mL no sería tan relevante debido a que estos niveles se consideran dentro del rango de normalidad y, por lo tanto, su importancia desde el punto de vista clínico es relativa. Sin embargo, debido a que pueden detectarse con baja frecuencia diferencias individuales (atribuidas probablemente a diferencias en los epitopes detectados por cada método), para los casos con fuerte presunción clínica y un valor de CEA incongruente, se sugiere repetir la determinación por medio de otra metodología.

The carcinoembryonic antigen (CEA) is a glycoprotein widely employed in colorectal cancer, mainly as evolutive marker and as measure of therapy's ef-ficacy. The goal of this work was to perform a comparative study between two analytical methods to measure serum CEA levels: electrochemiluminescence (ECL) and chemilumines-cence (CL) in serum samples of 57 patients with diagnosis of cancer, mainly colorectal. On the whole, an elevated correlation between ECL and CL (r=0.9135; p<0.00001) was obtained. When data was analyzed with a cut-off value of 4 ng/mL, the main discrepancy between methods occurred in the range of normal values (r=0.5716; p<0.0014; n=29). On the contrary, in concentrations higher than the cut-off, the cor-relation was very high (r=0.9453; p<0.00001; n=28). These results suggest that, in spite of the reports of manufacturers, the CEA values obtained by both methods are comparable. The lower correlation observed in values below 4 ng/mL would not be significant because those values are in the normal range and, for that reason, their clinical importance is minor. However, due to the individual differences that could be detected in some patients (probably resulting from the differences in epitopes detected by each method), in cases with strong clinical evidence without concordance with the CEA result, it could be necessary to repeat the determination using another methodology.

O antígeno carcinoembrionário (CEA) é uma glicoproteína amplamente usada como complemento do diagnóstico, monitoração de tratamento e evolução do câncer colorretal. O objetivo deste trabalho foi realizar uma análise comparativa entre dois métodos para a detecção do CEA: eletroquimioluminescência e quimio-luminescência em amostras de soro de 57 pacientes com diagnóstico de câncer, principalmente colorretal. Quando analisados os dados totais, houve uma correlação elevada (r=0,9135, p<0,00001). Quando realizado um corte dos resultados tomando como valor limite 4 ng/mL, observou-se que as maiores diferenças entre ambos os métodos estiveram nos valores considerados dentro da faixa dos valores normais (r=0,5716, p<0,0014, n=29). No entanto, nas concentrações superiores respeito do limite de corte, a correlação foi elevada (r=0,9453, p<0,00001, n=28). Estes resultados sugerem que, comparado com o descrito pelos fabricantes, os valores de CEA obtidos por ambos os métodos são comparáveis. A menor correlação observada nas concentrações inferiores a 4 ng/mL não seria tão relevante devido a que estes níveis consideram-se dentro da faixa de normalidade e, portanto, sua importância, do ponto de vista clínico, é relativa. Contudo, devido a que podem ser detectados com baixa frequência diferenças individuais (atribuídas provavelmente a diferenças nos epitopos detectados por cada método), para os casos com forte suspeita clínica e um valor de CEA incongruente, sugere-se repetir a determinação através de outra metodologia.

Niveles séricos de tetrayodotironina libre (T4L), mediante el método de electroquimioluminiscencia en caninos / Free tetraiodothyronine (FT4) serum levels by electrochemiluminescence method in canines

El presente estudio establece valores de referencia para niveles séricos de tetrayodotironina libre (T4L) en caninos mediante el método de electroquimioluminiscencia. Se utilizaron 180 caninos que fueron divididos en grupos según la edad y el sexo. Se encontraron diferencias altamente significativas (P<0,0001) relacionadas con la edad, sin encontrarse diferencias significativas con respecto al sexo para dicha hormona. Los resultados de este estudio sugieren que las concentraciones séricas de tetrayodotironina libre (ng/L) en caninos menores de 1año, de 1 a 7 años y mayores de 7 años, oscilan entre 9,90-11,74 ng/L, 8,51-11,74 ng/L y 7,48-8,64 ng/L, respectivamente. La determinación de T4L mediante electroquimioluminiscencia, puede considerarse útil como ayuda diagnóstica de posibles alteraciones tiroideas.

The present study establishes references values for free Tetraiodotironine (FT4) in canines using eletrochemiluminescence method. Blood samples from 180 canines divided in six groups of age (males and females), 30 animals for each group were used. Significant differences (P<0.0001) was found between age groups but not between sex groups. The canine average values for FT4 using this technique were as follow: younger than 1 year of age , 9.9 - 11.7 ng/L; from 1 to 7 years of age, 8.1 - 11.7 ng/L; older than 7 years of age 7.4- 8.6 ng/L. The electrochemiluminiscence method for measuring FT4 is valuable diagnostic tool in canine medicine.

Evaluación de telopéptido C del colágeno tipo I: en pacientes con cáncer de mama / Evaluation of telopeptid C of collagen type 1: in breast cancer patients

El cáncer de mama es la malignidad más común en las mujeres, se considera que alrededor del 90 por ciento de ellas mueren con metástasis; siendo la metástasis ósea la más frecuente. Estudio de seguimiento se determinó los níveles séricos de telopéptido C del colágeno tipo I en 60 pacientes con cáncer de mama y 30 controles sanos por electroquimioluminiscencia, para evaluar su expresión como marcador pronóstico de metástasis ósea. Los niveles séricos del telopéptido C fueron más elevados en las pacientes que desarrollaron metástasis comparado con las pacientes sin metástasis; se observó diferencia estadísticamente significativa entre estos grupos y controles sanos (p<0,05). A medida que transcurría el tiempo, los níveles del telopéptido C aumentaban y la sobrevida global disminuía. El 68,97 por ciento de las pacientes desarrollaron metástasis ósea exclusivamente, el 27,58 por ciento metástasis combinada y 3,45 por ciento metástasis pulmonar: observándose niveles más elevados de telopéptido C en metástasis combinada. El 87,8 por ciento de las pacientes desarrollaron tumor ductal infiltrante, y 12,2 por ciento lobulillar; más del 50 por ciento de los tumores eran grado histológico y nuclear II. Se encontró una correlación positiva entre los níveles séricos del telopéptido C y tamaño del tumor (r=0,32, P=0,02). Los resultados obtenidos permiten señalar que existe una correlación directa entre el nivel sérico del telopéptido C y la presencia de metástasis ósea; por lo cual este marcador puede tener utilidad pronóstica para la metástasis ósea en pacientes con cáncer de mama.

Breast cancer is the most common malignity among women, is considered that around 90 % of them die of metastasis; being the most frequent bone metastasis. This follow up study, we determined serum levels C-telopeptides of type I collagen in 60 patients with breast cancer and 30 safe controls by electrochemioluminiscense evaluate the significance of C- telopeptides of type I collagen as marker bone metastasis. We found C- telopeptides level was the highest on breast cancer patients developed bone metastasis with respect to patients did not. There was statistically significant difference between both groups (P>0.05); we observed that as time passed; the C-telopeptides levels increased the global surviving decreased. We found that 68.97 % patients developed bone metastasis exclusively, 27.58 % combined metastasis and 3.45 % lung metastasis; being observed the highest levels C-telopeptides on patients that developed combined metastasis. We found 87.8 % of patients had tumour type infiltrating duct, 12 % tumor lobulellar type; nuclear and histological type tumours was represented in more than 50 % mainly by type II. We found positive correlation between the levels of serum of C-telopeptides and tumour size (r=0.32, P=0.02). The results obtained allow us to say that there is a straight correlation between the levels of serum of C-telopeptides and the presence of bone metastasis; thus, C-telopeptides can be used as a prognosis marker to bone metastasis on breast cancer patient.